15800465385
当前位置:上海双赢生物科技有限公司 > 产品中心 > ELISA试剂盒目录 > 犬ELISA试剂盒 > 犬双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1 )ELISA试剂盒
联系人:李娜
电 话:15800465385
手 机:15800465385
地 址:上海市闵行区民北路88弄1-30号第22幢BN108室
邮 编:
传 真:
邮 箱:2734996763@qq.com
阿仪网商铺:http://www.app17.com/c103104/
手机网站:m.sh-sybio.com
价格:电议
采购度:158 原产地:中国大陆
发布时间:2022/7/8 10:59:27
犬双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1 )
酶联免疫吸附测定试剂盒
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中犬双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1 )。
l 有效期:6个月
l 保存条件:2-8℃
样本:血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等
标记物:人、大小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、羊、鸡、植物ELISA试剂盒等
试剂盒组成:
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
生物素标记抗体 | 6mL | 3mL | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注:
1. (96T/48T)打开包装后请及时检查所有物品是否齐全。
2. 标准品浓度依次为:40、20、10、5、2.5、0 U/L
3. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
检测准备工作:
1. 请提20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
3. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。。
实验原理:
试剂盒采用双抗体二步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被犬双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1 )捕获抗体包被微孔中,依次加入标本、标准品孵育,加入生物化抗体进行抗体生物素化,经过温育并彻底后加入HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的犬双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1 )呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品活性。
实验所需自备试验器材:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
5. 其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
6. 样品外观:样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
7. 样品保存:样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融,标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
注意事项:
1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6. 在储存和温育时避免强光直接照射。
7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9. 不能使用过期产品。
10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂盒性能:
1. 检测范围:0.1 U/L – 40 U/L。
2. 灵敏度:低检测浓度小于0.1 U/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
技术小提示:
1. 当混合或重溶蛋白溶液时,尽量避免起沫。
2. 为了避免交叉感染,配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。
3. 每次孵育时,请正确使用封板胶可保证结果的准确性。
4. 混合后的显色底物在上板应为无色,请避光保存;假如微孔板后,将由物色变成不同深度的蓝色。
5. 终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致;加入终止液后,孔内颜色由蓝变黄;若孔内有绿色,则表明孔内液体未混匀;请充分混合。
说明:
1. 由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。
2. 终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。
3. 不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。
4. 只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到佳的检测结果。
更新时间:2024/12/4 16:30:28
您感兴趣的产品* | 您还没有输入您感兴趣的产品 | |
您的单位* | 您还没有输入您的单位 | |
联系人* | 您还没有输入联系人 | |
联系电话* | 您还没有输入联系电话 | |
详细地址 | ||
常用邮箱 | 您输入的邮箱格式不正确 | |
请输入您对我们的意见或建议* | 您还没有输入您对我们的意见或建议 | |
验证码* | 您还没有输入验证码 |
温馨提示
1.遵守中华人民共和国有关法律、法规,尊重网上道德,承担一切因您的行为而直接或间接引起的法律责任。
2.请您真实的反映产品的情况,不要捏造、诬蔑、造谣。如对产品有任何疑问,也可以留言咨询。
3.未经本站同意,任何人不得利用本留言簿发布个人或团体的具有广告性质的信息或类似言论。