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科研elisa试剂盒实验中影响酶标曲线的因素

阅读次数:1995   发布时间:2021/7/21 16:04:33

科研elisa试剂盒实验中影响酶标曲线的因素

标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。我公司技术人员在处理售后的问题中,有不少科研朋友咨询曲线的问题。下面小编将影响ELISA试剂盒曲线问题的原因做了总结:
OD值不正常的可能原因是:
1、试剂盒未回温,试剂盒回温到25℃;
2、温度控制不好,控制正确温度;
3、孵育时间不准确,控制孵育时间;
4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加,洗涤4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、阳光直射,对着风直接吹,避风避;
6、酶标仪的波长错误,酶标仪的波长450nm;
7、抗体的稀释错误,正确的稀释抗体;
8、水质问题,用娃哈哈矿泉水代替。
白板的可能原因是:
1、洗涤液配制错误,正确的配制洗涤液;
2、少加液体(错加液体),正确的步骤加液体。
无梯度可能原因是:
1、标准品也污染,换标准品点板;
2、OD值不正常,控制温度时间在做一次;
3、人为点板,不要点板。
线性不好可能原因是:OD值不正常,控制温度时间在做一次。

 

ELISA实验酶标仪环境的重要性:
1. 为延缓光学部件的老化,应避免阳光直射。
2. 操作环境温度应在15℃至40℃之间,环境湿度在15%~85%之间。
3. 仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。
4. 操作时电压应保持稳定。
5. 操作环境空气清洁,避免水汽、烟尘。
6. 保持干燥、干净、水平的工作台面,以及足够的操作空间。
7. 仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。

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